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上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司

兔ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書
點(diǎn)擊次數(shù):1333 更新時(shí)間:2017-07-26

    上海遠(yuǎn)慕為您提供兔ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書,我司是經(jīng)銷生物科學(xué)領(lǐng)域的供貨商,自公司成立以來(lái),企業(yè)規(guī)模迅速發(fā)展中,生產(chǎn)加工和銷售的產(chǎn)品包括各種化學(xué)試劑、培養(yǎng)基、各種ELISA試劑盒、標(biāo)準(zhǔn)品等5萬(wàn)余種類。在業(yè)內(nèi)有*,咨詢!

    中文名:兔ELISA試劑盒

    別名:兔ELISA Kit

    供貨商:上海遠(yuǎn)慕

    檢測(cè)種屬:兔,羊,人,大鼠,小鼠等

    規(guī)格:48T/96T

    保存條件:2-8℃

    樣本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。

    研究領(lǐng)域:炎癥研究、神經(jīng)生物學(xué)、新陳代謝、信號(hào)通路、免疫學(xué)、傳染病、其他研究。

    優(yōu)點(diǎn):靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好。

    注意:僅用于科研,不適合臨床研究

 

兔ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書

 

    兔ELISA試劑盒試驗(yàn)原理:

    要用固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)。已知待測(cè)物質(zhì)濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將待測(cè)物質(zhì)和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中待測(cè)物質(zhì)的濃度呈比例關(guān)系。

 

    兔ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)自備物品

    1. 酶標(biāo)儀(450nm)

    2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

    3. 37℃恒溫箱

 

    兔ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書操作注意事項(xiàng)

    1. 試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20 分鐘。從冰箱取出的

    濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,這屬于正常現(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶*溶解

    后再使用。2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。

    3. 濃度為0 的S0 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對(duì)照或者空白;按照說(shuō)明

    書操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋5 倍,zui終結(jié)果乘以5 才是樣本實(shí)際濃度。

    4. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。

    5. 所有液體組分使用前充分搖勻。

 

    操作步驟

    1)使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。

    2)根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。

    3)加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。

    4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。

    5)每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。

    6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。

    7)每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。

    8)取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。

    9)在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

 

    兔ELISA試劑盒以下特點(diǎn):

    1.專一性強(qiáng)??乖c抗體的免疫反應(yīng)是專一反應(yīng),而免疫酶技術(shù)以免疫反應(yīng)為基礎(chǔ),所檢測(cè)的對(duì)象是抗原(或抗體),使用的抗體除標(biāo)記了酶以外,與普通抗體的免疫反應(yīng)特性并無(wú)多大差別。

    2.靈敏度高。由于抗體聯(lián)結(jié)上了酶,因此,借助于酶與底物的顯色反應(yīng),顯示抗原與抗體的結(jié)合,大大提高了檢測(cè)的靈敏性,使檢測(cè)水平接近放射免疫測(cè)定法。

    3.樣品易保存。經(jīng)過(guò)酶反應(yīng)顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定,因此有利于樣品的保存。

    4.結(jié)果易觀察。對(duì)檢測(cè)結(jié)果即可用肉眼觀察,又可用顯微鏡觀察,也可以用分光光度計(jì)進(jìn)行比色測(cè)定,還可用顯微鏡觀察。這是因?yàn)槟承┟阜磻?yīng)產(chǎn)物能使電子密度發(fā)生改變,從而引起被檢測(cè)物的顯示。

    5.可以定量測(cè)定。溶液中的抗原物質(zhì),應(yīng)用酶免吸附技術(shù)進(jìn)行比色測(cè)定,依據(jù)光密度值的變化,可以定量。預(yù)計(jì)用細(xì)胞分光光度計(jì)可對(duì)組織內(nèi)的抗原進(jìn)行免疫酶技術(shù)的定量測(cè)定。

    6.可以大規(guī)模測(cè)定樣品。如有成千上萬(wàn)份樣品需要進(jìn)行檢測(cè),免疫酶技術(shù)都能在較短時(shí)間內(nèi)完成。

    7.儀器和試劑簡(jiǎn)單。對(duì)免疫沒(méi)技術(shù)來(lái)說(shuō),不需要熒光顯微鏡,也不需要測(cè)定放射性的特殊儀器,所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑,普通實(shí)驗(yàn)室及生產(chǎn)應(yīng)用單位均易購(gòu)置。

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