質粒小量提取試劑盒II型，Plasmid Mini Kit II(50)詳細介紹
美國Omega包含了多款系列的提取試劑盒及實驗耗材，溶液等，包含：快速過濾超大量質粒提取試劑盒，質粒小量提取試劑盒I型，質粒大量提取試劑盒，質?？焖僦辛刻崛≡噭┖?，質粒快速大量提取試劑盒，酵母質粒提取試劑盒，96孔板快速過濾質粒提取試劑盒，其他系列等，作為Omega代理商，上海遠慕生物秉承信譽為生存之本的宗旨，對于產品的質量上是層層把關，價格上也非常實惠，訂購！
名稱：質粒小量提取試劑盒II型
品牌：Omega
供應商：上海遠慕
系列：質粒小量提取試劑盒
貨號：D6945-01
型號：Plasmid Mini Kit II(50)
用途：從小于15ml培養(yǎng)過夜的菌液提取50-70ug高純度質粒DNA
質粒小量提取試劑盒II型使用范圍與技術指標：
1.適用于從菌液中提取各類高、中、低拷貝量的質粒。
2.本試劑盒可純化長度達15kb的質粒。
3.過夜培養(yǎng)的菌液（一般OD600>1.5），高拷貝量質粒提取能力每毫升菌液可達4-6μg，如pUC18等；中低拷貝量質粒每毫升菌液1-3μg，如pET系列載體。
質粒小量提取試劑盒采用經典的堿裂解法和硅膠柱純化方式，適合于從1.5-5.0ml培養(yǎng)過夜的大腸桿菌(DH5α, JM109)等菌液中抽提5-35µg高純度的質粒DNA。操作者可在30分鐘內完成多個樣品的質粒提取工作。純化的質?？梢灾苯佑糜谧詣訙y序、限制性內切酶酶切、PCR、標記等實驗。從1.5-5.0ml培養(yǎng)過夜的菌液中收集細菌后，采用經典的堿裂解法裂解細菌，離心去除染色體DNA和蛋白質，上清液轉移至硅膠柱，離心吸附質粒DNA，經兩種溶液洗滌去除殘余蛋白質和各種雜質，zui后用Elution Buffer洗脫出質粒DNA。
Plasmid Mini Kit II(50)，質粒小量提取試劑盒II型使用流程：
*次使用時，將試劑盒攜帶的RNaseA全部加入到溶液SI中，混合均勻，4°C保存。
1.取2ml菌液，8,000rpm離心1min，去除上清，收集菌體，倒盡或吸干培養(yǎng)基。（菌液較多時可以通過多次離心將菌體沉淀收集到一個離心管中，一般可多至6-10ml菌液）。
2.向留有菌體沉淀的離心管中加入150μl溶液SI(請先檢查是否已加入RNaseA），吸打或振蕩至*懸浮菌體。（如果菌塊未*混勻，會影響質粒的得率和質量）。
3.向離心管中加入250μl溶液SⅡ，溫和地顛倒離心管6-8次使菌體讓其裂解。（混勻一定要溫和，與之前步驟相比，此時菌液應變得清亮粘稠，作用時間不要超過5min）。
4.向離心管中加入400μl溶液SⅢ，立即顛倒離心管6-8次，充分混勻，此時會出現白色沉淀。
5.12,000rpm離心5-10min。（如果上清中還有微小白色沉淀，可再次離心后取上清）小心地將上清移入吸附柱中，室溫放置2分鐘，8,000rpm離心1min，倒掉收集管中的液體，將吸附柱放入同一個收集管中。（過柱后液體可進行第2次過柱，增加回收效率）。
6.向吸附柱中加入700μl洗滌液WB(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇)，8,000rpm離心1min，棄廢液，將吸附柱放入收集管中。
7.向吸附柱中加入500μl洗滌液WB，8,000rpm離心1min，棄廢液。
8.12,000rpm離心2min，將吸附柱敞口置于室溫2-3分鐘，目的是去除吸附柱中殘余的洗滌液WB。
9.將吸附柱放入一個干凈的1.5ml收集管中，向吸附膜中央加入100-150μl EB(將EB預熱至60℃可以進一步提高得率），室溫放置2min，12,000rpm離心1min。(為了增加質粒的回收效率，可將收集液 EB分兩次洗脫，每次50μl加入吸附柱中，效率明顯有提升)。
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標簽：Plasmid Mini Kit II(50) 質粒小量提取試劑盒II型 質粒小量提取試劑盒
質粒提取試劑盒
