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菌種保藏及活化使用說(shuō)明
點(diǎn)擊次數(shù):678 更新時(shí)間:2023-05-25

菌種保藏的方法很多,但原理大同小異。首先要挑選優(yōu)良純種。利用微生物的孢子、芽孢及營(yíng)養(yǎng)體;其次,根據(jù)其生理、生化性,人為創(chuàng)造低溫、干燥或缺氧等條件,抑制微生物的代謝作用,使其生命活動(dòng)降低到極低的程度或處于休眠狀態(tài),從而延長(zhǎng)菌種生命以及使菌種保持原有的形狀,防止變異。不管采用哪種保藏方法,在菌種保存過(guò)程中要求不死亡、不污染雜菌和不退化。

短期:斜面保藏

斜面保藏是目前最pu遍的短期保藏法,操作簡(jiǎn)單,使用方便,但需定期接種。因此工作量較大,而且傳代次數(shù)多易發(fā)生變異,因此,僅適用于短期經(jīng)常使用的菌種。

1. 配制培養(yǎng)基,營(yíng)養(yǎng)成分濃度稍低為宜,特別是糖類(lèi)盡可能降低,產(chǎn)酸菌種,則應(yīng)添加少量碳酸鈣;

2. 斜面裝液量,斜面以?xún)A斜后不超過(guò)試管長(zhǎng)度 1/2 為宜;

3. 斜面培養(yǎng),溫度較最適稍低,時(shí)間較最適略長(zhǎng);

4. 生長(zhǎng)完成后,密封置于 2~8℃的冰箱中保藏。每傳代一次,霉菌、放線(xiàn)菌及有芽孢的細(xì)菌可保存 1~3 個(gè)月,酵母菌 2 個(gè)月,細(xì)菌1個(gè)月。

活化使用:

將斜面從冰箱中取出,細(xì)菌挑取菌落增菌,或霉菌切塊傳代培養(yǎng),培養(yǎng)好即可使用。

長(zhǎng)期:冷凍保藏

冷凍保藏是目前使用較為廣泛的長(zhǎng)期保藏法之一,適用于所各類(lèi)微生物,較之于斜面保藏,減少了工作量,延長(zhǎng)了保藏時(shí)間。

1. 準(zhǔn)備斜面或平板新鮮培養(yǎng)物一個(gè),10%的無(wú)菌甘油溶液;

2. 用甘油溶液將菌體或孢子洗脫下來(lái),形成菌懸液;

3. 菌懸液分裝,凍存管裝液 1mL/支,后置于程序降溫盒;

4. 將程序降溫盒置于-80℃冰箱凍存;

5. 可保藏 1-2 年。

活化使用:

1. 將凍存菌株置于凍存盒中取出,準(zhǔn)備水浴溶解,切勿常溫融化;

2. 將菌株迅速置于水浴速溶,細(xì)菌 40℃,真菌 30℃,約 2min 全部溶解后接種到適宜培養(yǎng)基;

3. 采用適宜條件培養(yǎng)完成即可。

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