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細(xì)菌鑒定的酶類試驗介紹
點擊次數(shù):750 更新時間:2023-06-06

  細(xì)菌鑒定的酶類試驗是細(xì)菌的生化反應(yīng)中酶類的存在與否等生化特性,這些反應(yīng)能夠?qū)е路磻?yīng)體系的PH值變化或產(chǎn)生顯色物質(zhì),加入合適的酸堿指示劑或顯色劑就可以反映出來。

  氧化酶試驗

  氧化酶(細(xì)胞色素氧化酶)是細(xì)胞色素呼吸酶系統(tǒng)的最終呼吸酶。具有氧化酶的細(xì)菌,首先使細(xì)胞se素C氧化,再由氧化的細(xì)胞se色素C使對苯二胺氧化,生成有色的醌類化合物。

  試驗方法

  1)菌落法:直接滴加氧化酶試劑于被檢菌菌落上;

  2)濾紙法:取潔凈濾紙一小塊,蘸取菌少許,然后加氧化酶試劑;

  3)試劑紙片法:將濾紙片浸泡于氧化酶試劑中制成試劑紙片,取菌涂于試劑紙上。

  結(jié)果判讀

  細(xì)菌在與試劑接觸10s內(nèi)呈深紫色,為陽性。為保證結(jié)果的準(zhǔn)確性,分別以銅綠假單胞菌和大腸埃希菌作為陽性和陰性對照。

  臨床應(yīng)用及意義

  主要用于腸桿菌科細(xì)菌與假單胞菌的鑒別,前者為陰性,后者為陽性。奈瑟菌屬、莫拉菌屬細(xì)菌也呈陽性反應(yīng)。此外,也用于假單胞菌屬與腸桿菌科細(xì)菌的區(qū)別,前者陽性,而后者陰性。產(chǎn)堿桿菌屬等均為陽性。

  異常結(jié)果: 奈瑟菌屬有腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等9種致病菌,引起流行性腦脊髓膜炎

  上呼吸道癥狀:鼻咽炎等全身感染癥狀:高熱、出血點或瘀血點,腦膜炎癥狀:頭痛、嘔吐、頸項強直;引起淋病,引起新生兒淋病性眼結(jié)膜炎。

  觸酶試驗

  觸酶又稱過氧化氫酶,具有過氧化氫酶的細(xì)菌,能催化過氧化氫成為水和原子態(tài)氧,繼而形成氧分子,出現(xiàn)氣泡。大多需氧和兼性厭氧菌均產(chǎn)生過氧化氫酶,但鏈球菌科陰性,故常用此試驗來鑒定。分枝桿菌的鑒別則用耐熱觸酶試驗,結(jié)核分枝桿菌為陰性,戈氏分枝桿菌和地分枝桿菌為陽性。

  試驗方法

  取潔凈玻片1張,用接種環(huán)挑取細(xì)菌,加3%的H2O2 1滴,立即觀察結(jié)果。

  結(jié)果判讀

  若立即出現(xiàn)大量氣泡為陽性。無氣泡為陰性。

  臨床應(yīng)用及意義

  大多需氧和兼性厭氧菌均產(chǎn)生過氧化氫酶,但鏈球菌科陰性,故常用此試驗來鑒定。此外,金氏桿菌屬的細(xì)菌也為陰性。分枝桿菌的鑒別則用耐熱觸酶試驗,結(jié)核分枝桿菌為陰性,戈氏分枝桿菌和地分枝桿菌為陽性。

  注意事項

 ?、?試驗時應(yīng)避免接觸含鐵物質(zhì),以免出現(xiàn)假陽性。

 ?、?10g/L鹽酸四甲基對苯二胺或10g/L鹽酸四甲基對苯二胺水溶液為無色溶液,在空氣中易被氧化而失效,故應(yīng)經(jīng)常更換新試劑,并盛于棕色瓶中,若試劑已變成深藍色,應(yīng)棄去不用。

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