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牛血清白蛋白(BSA)試驗(yàn)應(yīng)用介紹
點(diǎn)擊次數(shù):310 更新時間:2023-09-01

牛血清白蛋白(BSA),是牛血清中的一種球蛋白,包含607個氨基酸殘基,分子量為66.446KDa,等電點(diǎn)為4.7。牛血清白蛋白在生化實(shí)驗(yàn)中有廣泛的應(yīng)用。

主要成分:

1.蛋白質(zhì)——是牛血清中主要成份。除包括可攜帶金屬離子、脂肪酸和自身是激素類蛋白外主要還有白蛋白,球蛋白。

2.多肽——血小板促生長因子能促細(xì)胞分裂,是多肽家庭的主要成員之一,是主要的促細(xì)胞增殖因子;成纖維細(xì)胞生長因子、表皮細(xì)胞生長因子、神經(jīng)細(xì)胞生長因子等,血清中含量雖很少,但對細(xì)胞生長也有一定作用。

3.激素——胰島素:促進(jìn)細(xì)胞攝取葡萄糖和氨基酸,與促細(xì)胞分裂有關(guān);類胰島素生長因子:能與細(xì)胞表達(dá)的胰島素受體結(jié)合,從而有胰島素同樣的作用;促生長激素:促細(xì)胞增殖效應(yīng)。

4.其他成份——氨基酸、葡萄糖、酮酸等對多種營養(yǎng)成分的合成培養(yǎng)基意義不大。與蛋白相結(jié)合狀態(tài)的微量元素對細(xì)胞培養(yǎng)有意義。

結(jié)構(gòu)與作用:

牛血清中的簡單蛋白,是血液的主要成分(38g/1000ml),分子量68kD。等電點(diǎn)4.8。含氮量16%,含糖量0.08%。僅含己糖和己糖胺,含脂量只有0.2%。白蛋白由581個氨基酸殘基組成,其中35個半胱an酸組成17個二硫鍵,在肽鏈的第34位有一自由巰基。白蛋白可與多種陽離子、陰離子和其他小分子物質(zhì)結(jié)合。血液中的白蛋白主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營養(yǎng)作用。在動物細(xì)胞無血清培養(yǎng)中,添加白蛋白可起到生理和機(jī)械保護(hù)作用和載體作用。牛血清白蛋白(BSA),又稱第五組分,是牛血清中的一種球蛋白,包含583個氨基酸殘基,分子量為66.430 Da,等電點(diǎn)為4.7。牛血清白蛋白在生化實(shí)驗(yàn)中有廣泛的應(yīng)用,例如在wesern blot中作為Blocking agent。

BSA一般做為穩(wěn)定劑被用于限制酶或者修飾酶的保存溶液和反應(yīng)液中,因?yàn)橛行┟冈诘蜐舛认虏环€(wěn)定或活性低。加入BSA后,它可能起到“保護(hù)"或“載體"作用,不少酶類添加 BSA后能使其活性大幅度提高。不需要加BSA的酶加入BSA一般不會受到什么影響。對多數(shù)底物DNA而言,BSA可以使酶切更wan全,并可實(shí)現(xiàn)重復(fù)切割。在37℃,酶切反應(yīng)超過1h時,BSA可以使酶更加穩(wěn)定,因?yàn)樵诓缓珺SA的反應(yīng)緩沖液中,許多限制性內(nèi)切酶在37℃下只能存活10"20min甚至更短的時間。而BSA可以結(jié)合緩沖液或底物DNA中抑制限制性內(nèi)切酶活性的金屬離子和其它化學(xué)物質(zhì)。

牛血清白蛋白(BSA)的用途如下

1、用于生化研究、遺傳工程和醫(yī)藥研究

2、用作醫(yī)藥保健食品、調(diào)味品

3、維持滲透壓、pH緩沖、載體作用

4、在PCR體系中有助于Taq酶的穩(wěn)定性及活性,可以提高PCR的效率

應(yīng)用:

牛血清白蛋白(BSA)在生化實(shí)驗(yàn)中有廣泛的應(yīng)用, 例如在WB實(shí)驗(yàn)中加入BSA, 通過提高溶液中蛋白質(zhì)的濃度,對酶起保護(hù)作用。防止酶的分解和非特異性吸附,能減輕有些酶的變性,減輕不利環(huán)境因素如加熱,表面張力及化學(xué)因素引起的變性的。

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