少妇无码久久一区二区三区,扒开双腿抽打花蒂惩罚室,对白荡伦系列之子你不能这样我,美男被强行糟蹋np各种play

上海遠慕生物科技有限公司

凍存細胞注意事項,必看!
點擊次數(shù):556 更新時間:2023-09-06

咱就是說細胞想要長期保存,那肯定是需要凍存起來放液氮保存。那怎樣凍存細胞才能保證細胞能正常復蘇,不至于凍存死亡呢?下面遠慕就來講講細胞凍存應該注意的一些地方。

1. 保持凍存前細胞狀態(tài)良好

凍存前一定要保證細胞狀態(tài)良好,細胞處于對數(shù)生長期,否則不管后面怎么處理,凍存后的細胞狀態(tài)必然有影響。若細胞密度偏高,培養(yǎng)基已經(jīng)略微變黃,細胞狀態(tài)正常,需要換液培養(yǎng)2h以上再凍存細胞;若已wan全變黃,細胞死亡超過20%,需要傳代后再重新培養(yǎng)至狀態(tài)正常后再凍存細胞。

2. 消化、吹打細胞按盡量輕柔

如何正確消化、吹打細胞在前面已經(jīng)講過了,有興趣的話可以到以往文章里看看,這里就不再贅述了。凍存后細胞培養(yǎng)瓶和培養(yǎng)皿肯定還是會殘留一點細胞,這些殘留的細胞加新的培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如果培養(yǎng)正常就可以看出凍存時消化、吹打操作是沒有問題的,如果直接死了或者狀態(tài)不好,那凍存的細胞自然也好不到哪里去,問題出在哪就很明顯了。

3. 凍存液配方要給合適的

凍存液配方這個其實不同實驗室都有自己的習慣,有FBS+10%DMSO的,也有wan全培養(yǎng)基+10%DMSO的,還有基礎培養(yǎng)基+血清+DMSO=7:2:1 6:3:1 5:4:1,可以說是五花八門,但總體來說,DMSO一般是不超過12%的,血清濃度越高凍存效果也越好,因此需要多凍幾次對比合適的配方。

4. 凍存液要提前配置

凍存液使用時要提前配好,不能直接在細胞懸液中加DMSO凍存細胞,否則DMSO溶解時濃度不均加上溶解放熱會損傷細胞活性??梢袁F(xiàn)配先用,也可以多配一點,4度最多可以保存3個月,-20度可以保存一年。細胞用凍存液重懸后應盡快放到4度或者程序性凍存盒開始凍存,避免長時間室溫狀態(tài),因為室溫條件下DMSO對細胞是有害的。

5. 凍存細胞數(shù)量選擇

通常來說,凍存細胞都會有一部分細胞死亡,所以凍存剩下的活細胞數(shù)量才是決定細胞復蘇后能否正常養(yǎng)起來的關鍵。一般凍存不容易死的細胞數(shù)量每管在100-200萬就夠了,一些凍存很容易死的細胞,比如NK92、THP-1、SF9等細胞數(shù)量要稍微高點,300-400萬左右為宜。凍存液一般1ml左右每管,這個基本每個實驗室都差不多。

6. 凍存程序選擇

凍存的時候可以選擇用程序性凍存盒直接放到-80度凍存細胞,但要記得異丙醇要及時更換,一般用4-5次異丙醇含水量就超標了,不再適合凍存細胞使用。也可以將凍存管依次在4度10min,-20度2h,-80過夜后液氮保存。-80度不適合細胞長期保存,只能短期保存,最好不要超過一周,否則有部分細胞系活性可能會下降很厲害,長期保存的細胞最好放液氮罐保存。

7. 注意凍存檢查

凍存細胞后應在同一批次內(nèi)隨機選一只細胞復蘇檢測凍存效果, 如果復蘇效果不佳的話需要找到問題所在摸索合適條件重新凍存細胞,如果復蘇良好的就可以放到液氮里長期保存了。這個也是前面推薦將凍存剩下的細胞繼續(xù)培養(yǎng)的原因,可以有效避免細胞凍存失敗導致絕種。



上海遠慕生物科技有限公司 版權所有 地址:上海市嘉定區(qū)曹安公路5588號 郵編:201202 電話: 管理登陸
傳真:021-58999639 手機:13310162040 聯(lián)系人:俞燕熙 郵箱:m13310162040@163.com  GoogleSitemap 網(wǎng)址:www.ylpopo.com ICP備案號:滬ICP備14029423號-1
主營:ELISA試劑盒/染色液/溶液 /動物血清/標準品/化學試劑
點擊這里給我發(fā)消息
手機:13310162040
啊灬啊灬啊灬快灬深用力a片 | 被部长玩的漂亮人妻| 女人高潮抽搐潮喷小视频| 日本少妇又色又爽又高潮| 国产未成女一区二区三区| 97国产av传媒视频在线观看| 午夜a成v人电影| yy11111光电影院| 爆乳美女脱内衣18禁裸露网站| 男女差差差差差打扑克视频| 性xxxx欧美孕妇奶水| 西瓜在线看免费观看视频| 四虎永久在线精品免费网址| 东北粗口国产床| 偷玩熟睡醉酒体育壮男gv| 校花四肢被绑在床扒衣故事| 亚洲av无码乱码精品国产| 人妻臀部不断上下耸动| 女生裸妆bb| 欧美大香线蕉线伊人久久| 老汉的性生生活1一7| 资本主义生产关系| 人妻 校园 激情 另类| 粗大的内捧猛烈进出爽大牛汉子文| 亚洲色成人网站www永久四虎| 丰满少妇被猛烈进入a片| 人妻系列无码专区免费视频| 成人国产精品玖玖热色欲| 我与亲生的性关系自述| 青青精品视频国产| 无码人妻丰满熟妇区毛片| 国产精品成人69xxx| 特黄三级又爽又粗又大| 人妻无码人妻有码中文字幕| 国产情侣一区二区| 11孩岁女精品A片AV| 精品一区二区三区无码AV| 中国老熟妇MATURESEX| 色狠狠久久AV五月丁香| 人性情感短片视频高清| 丰满人妻熟妇乱偷人无码|