少妇无码久久一区二区三区,扒开双腿抽打花蒂惩罚室,对白荡伦系列之子你不能这样我,美男被强行糟蹋np各种play

上海遠慕生物科技有限公司

凍存細胞注意事項,必看!
點擊次數(shù):556 更新時間:2023-09-06

咱就是說細胞想要長期保存,那肯定是需要凍存起來放液氮保存。那怎樣凍存細胞才能保證細胞能正常復蘇,不至于凍存死亡呢?下面遠慕就來講講細胞凍存應該注意的一些地方。

1. 保持凍存前細胞狀態(tài)良好

凍存前一定要保證細胞狀態(tài)良好,細胞處于對數(shù)生長期,否則不管后面怎么處理,凍存后的細胞狀態(tài)必然有影響。若細胞密度偏高,培養(yǎng)基已經(jīng)略微變黃,細胞狀態(tài)正常,需要換液培養(yǎng)2h以上再凍存細胞;若已wan全變黃,細胞死亡超過20%,需要傳代后再重新培養(yǎng)至狀態(tài)正常后再凍存細胞。

2. 消化、吹打細胞按盡量輕柔

如何正確消化、吹打細胞在前面已經(jīng)講過了,有興趣的話可以到以往文章里看看,這里就不再贅述了。凍存后細胞培養(yǎng)瓶和培養(yǎng)皿肯定還是會殘留一點細胞,這些殘留的細胞加新的培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如果培養(yǎng)正常就可以看出凍存時消化、吹打操作是沒有問題的,如果直接死了或者狀態(tài)不好,那凍存的細胞自然也好不到哪里去,問題出在哪就很明顯了。

3. 凍存液配方要給合適的

凍存液配方這個其實不同實驗室都有自己的習慣,有FBS+10%DMSO的,也有wan全培養(yǎng)基+10%DMSO的,還有基礎培養(yǎng)基+血清+DMSO=7:2:1 6:3:1 5:4:1,可以說是五花八門,但總體來說,DMSO一般是不超過12%的,血清濃度越高凍存效果也越好,因此需要多凍幾次對比合適的配方。

4. 凍存液要提前配置

凍存液使用時要提前配好,不能直接在細胞懸液中加DMSO凍存細胞,否則DMSO溶解時濃度不均加上溶解放熱會損傷細胞活性??梢袁F(xiàn)配先用,也可以多配一點,4度最多可以保存3個月,-20度可以保存一年。細胞用凍存液重懸后應盡快放到4度或者程序性凍存盒開始凍存,避免長時間室溫狀態(tài),因為室溫條件下DMSO對細胞是有害的。

5. 凍存細胞數(shù)量選擇

通常來說,凍存細胞都會有一部分細胞死亡,所以凍存剩下的活細胞數(shù)量才是決定細胞復蘇后能否正常養(yǎng)起來的關鍵。一般凍存不容易死的細胞數(shù)量每管在100-200萬就夠了,一些凍存很容易死的細胞,比如NK92、THP-1、SF9等細胞數(shù)量要稍微高點,300-400萬左右為宜。凍存液一般1ml左右每管,這個基本每個實驗室都差不多。

6. 凍存程序選擇

凍存的時候可以選擇用程序性凍存盒直接放到-80度凍存細胞,但要記得異丙醇要及時更換,一般用4-5次異丙醇含水量就超標了,不再適合凍存細胞使用。也可以將凍存管依次在4度10min,-20度2h,-80過夜后液氮保存。-80度不適合細胞長期保存,只能短期保存,最好不要超過一周,否則有部分細胞系活性可能會下降很厲害,長期保存的細胞最好放液氮罐保存。

7. 注意凍存檢查

凍存細胞后應在同一批次內(nèi)隨機選一只細胞復蘇檢測凍存效果, 如果復蘇效果不佳的話需要找到問題所在摸索合適條件重新凍存細胞,如果復蘇良好的就可以放到液氮里長期保存了。這個也是前面推薦將凍存剩下的細胞繼續(xù)培養(yǎng)的原因,可以有效避免細胞凍存失敗導致絕種。



上海遠慕生物科技有限公司 版權所有 地址:上海市嘉定區(qū)曹安公路5588號 郵編:201202 電話: 管理登陸
傳真:021-58999639 手機:13310162040 聯(lián)系人:俞燕熙 郵箱:m13310162040@163.com  GoogleSitemap 網(wǎng)址:www.ylpopo.com ICP備案號:滬ICP備14029423號-1
主營:ELISA試劑盒/染色液/溶液 /動物血清/標準品/化學試劑
點擊這里給我發(fā)消息
手機:13310162040
孕妇高潮xxxxx孕妇| 性大毛片视频| 亚洲精品国精品久久99热| 潘金莲激情三级做爰| 妻子6免费完整版电影| 无码人妻一区二区三区在线视频| 亚洲色少妇熟女11p| 老师揉捏爆乳巨胸挤奶视频| 女人被狂C躁到高潮视频免费网站| 金瓶悔1一5扬思敏完整版| 日韩欧美群交p片內射中文| 久久久精品波多野结衣| 久久久久亚洲av无码专区首| www.色五月| 精品一区二区三区| 贵妇情欲按摩a片| 国产无套流白浆视频免费| japanesefreel体内精日本| 国产精品美女一区二区三区| 疯狂揉小泬到失禁高潮视频| 少妇挤奶水a片无码网站| 中文乱码人妻系列一区二区| 久久久久久精品国产亚洲| 久久久AV波多野一区二区| 国产老师色诱我好爽在线观看 | 故意穿暴露被强好爽h| 久久久老熟女一区二区三区| 国产福利精品一区二区| 永久免费毛片在线播放| 初小videos第一次摘花| 性一交一乱一交a片久久四色| 亚洲人成网亚洲欧洲无码久久| 人妻夜夜爽天天爽三区麻豆av网站 | 樱花草视频WWW| 岛国AV无码一区二区三区| 亚洲国产精华液网站w| 欧美亚洲日韩国产区一| 人人妻人人添人人爽欧美一区| 日本一大免费高清| 亚洲v欧美v国产v在线观看| 陪读庥麻张开腿让我爽了一晚播放|