少妇无码久久一区二区三区,扒开双腿抽打花蒂惩罚室,对白荡伦系列之子你不能这样我,美男被强行糟蹋np各种play

上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司

RNA抽提的竅門與提高得率分享
點(diǎn)擊次數(shù):356 更新時間:2023-09-15

RNA抽提的竅門

1:快速阻止 Rnase 活性 – 樣品收集后快速冷凍,裂解時快速操作滅活 Rnase。

2:選擇合適的抽提方法 – 高核酶含量的組織,脂肪組織最好用含苯ben酚的方法。

3:預(yù)判質(zhì)量要求 – Northern,cDNA 文庫構(gòu)建對完整性要求高,RT-PCR, RPA (Ribonuclease protection assay) 對完整性要求不是很高。RT-PCR 對純度 (酶抑制物殘留) 要求很高。

4:徹di底勻漿是提高得率和降低降解的關(guān)鍵。

5:檢查 RNA 的完整性 – 電泳檢測,28S:18S =2:1 是完整的標(biāo)志,1:1 對大部分實(shí)驗(yàn)也是可以接受的。

6:去除 DNA – 用于 RT-PCR, array analysis 最好用 Dnase I 去除 DNA。

7:降低外源酶的污染 – 不能從外面又導(dǎo)入酶。

8:低濃度的核酸濃縮時,要加入助沉淀試劑。但要防止助沉淀劑含酶及 DNA 污染。

9:徹di底溶解 RNA,必要時可以 65C 加熱 5 分鐘。

10:合適的保存方法 – 短時間可以 –20C 保存,長期請保存于 –80C。

提高RNA得率

首先要意識到不同得樣品其 RNA 含量差別很大。高豐度 (2-4ug/mg) 的如肝臟,胰腺,心臟,中豐度 (0.05-2ug/mg) 的如腦,胚胎,腎臟,肺,胸腺,卵巢,低豐度 (<0.05ug/mg) 的如膀胱,骨,脂肪。

1:裂解細(xì)胞使 RNA 釋放出來 – RNA 如果不被釋放出來,得率是會降低的。電動勻漿比其它勻漿方法效果更好,但也可能需要結(jié)合其它得方法,如液氮搗碎,酶消化 (Lysozyme/Lyticase)

2:抽提方法的優(yōu)化。基于苯ben酚的方法的最大問題是分層不徹di底和部分 RNA 的丟失(不能全部將上清取出)。分層不徹di底是因?yàn)楹怂岷偷鞍踪|(zhì)含量高,可以用增加裂解液使用量或者降低樣品量解決。脂肪組織要增加一步氯仿抽提。RNA 的丟失可以用反抽方法或者去除有機(jī)層后再離心的方法降低?;谥x心式方法的最大問題是樣品過量。

上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司 版權(quán)所有 地址:上海市嘉定區(qū)曹安公路5588號 郵編:201202 電話: 管理登陸
傳真:021-58999639 手機(jī):13310162040 聯(lián)系人:俞燕熙 郵箱:m13310162040@163.com  GoogleSitemap 網(wǎng)址:www.ylpopo.com ICP備案號:滬ICP備14029423號-1
主營:ELISA試劑盒/染色液/溶液 /動物血清/標(biāo)準(zhǔn)品/化學(xué)試劑
點(diǎn)擊這里給我發(fā)消息
手機(jī):13310162040
天天做天天爱天天综合网2021| 99久久人妻精品免费二区| 99精品国产在热久久无码| 爱的色放在线观看| 拧花蒂尿用力按凸起喷水尿| 精品人妻无码一区二区三区性| 日韩毛片无码永久免费看| 翁与小莹浴室欢爱51章| 野外被三个男人躁一夜小说| 农村艳妇疯狂做爰| 青丝影院视频在线播放| 无码中文字幕日韩专区| 娇小w搡bbbb搡bbb| a级毛片无码免费真人久久| 小13箩莉黄瓜自慰喷白浆| 日韩毛片无码永久免费看| 无遮挡1000部拍拍拍免费| 永久免费AV无码入口国语片| 18岁禁止入内| 久久精品国产亚洲AV麻豆蜜芽| 中文字幕| 熟妇人妻一区二区三区四区 | 国产亚洲精品久久久久久久久动漫| 国产成人免费爽爽爽视频| 图片 小说 校园 激情 都市| 国产三级在线观看播放| 欧美 大陆 偷拍 精品| 后入内射国产一区二区| 国产中文字幕乱人伦在线观看| 无码人妻aⅤ一区二区三区| 久久久久无码国产精品一区 | 看同性男aa片| 免费毛片在线看不用播放器 | 一边喂奶一边同房| 波多野结衣电影| 亚洲精品无码永久在线观看男男| 乡村大坑的性事小说| 丰满人妻一区二区三区免费视频| 啊灬啊别停灬用力啊老师| 医生h调教纯情丫头扩y器| 永久免费观看不收费的软件app|